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加葡萄糖(处理③)。在基础配方中添加牛肉膏和蛋白胨后,虫草生长与只添加无机盐相比没有明显差别,推测牛肉膏和蛋白胨提供的主要营养物质———磷酸盐、碳源、氮源和维生素在磷酸二氢钾和硫酸镁存在的情况下已并非限制性因子,即达到了营养饱和。因此再添加并不能有促进生长作用,反而由于添加物质过多导致培养基缝隙过密,不利于出草。处理⑤和处理⑥的无机盐和葡萄糖添加量相等,但分别添加了牛肉膏和蛋白胨,虫草生长出现统计学差异,这可能是由于牛肉膏和蛋白胨分别添加导致培养基中C:N比例改变,牛肉膏中提供大量碳源,而蛋白胨提供大量氮源,而只有在合适的C:N前提下,虫草子实体才能正常生长[7]。在葡糖糖提供了足够碳源的基础上,培养基中添加蛋白胨更适合虫草生长。在大米培养基中只添加有机质(处理②),虫草的生长和只添加无机盐相当,因此,在实际生产中,性质稳定而价格较低的无机盐更为实用。
袋栽与瓶栽过程相似,只是采用聚乙烯或聚氯乙烯塑料袋,装至离袋口约10cm处,收拢袋口,套塑料套环,加棉塞。灭菌,在无菌条件下接种培养。当菌丝长到袋的1/2左右时拔去棉塞和套环,露出料面,让其出芝。注意不要过早打开袋口,以免菌丝干涸而影响子实体发生。段木栽培选择栎树、榆树、桦木等阔叶树种,树龄7~10年,树径6~15cm。砍伐截段伐树在落叶后至翌年萌芽前进行,砍伐时不要损伤树皮。接种前锯成段,浸水12?15h,增加含水量,以利发菌。打孔接种用皮带冲安装在接种锤上打孔,直径约9.6?10mm,随即用接种枪接入菌种,然后用树皮盖封穴,接种选晴天进行,做到边打孔,边接种,边封穴。
高温烧菌培养室温度太高,杂菌易生长;发菌期菌袋内温度升至32弋以上,没及时疏袋散热,造成烧袋,致使绿霉等杂菌严重感染。培菌时有两个升温关键期,一是菌种萌发覆盖料面后的迅速生长期;二是早春气温迅速升高。高温烧菌后,病害症状没及时表现出来,但由于灵芝菌丝受损严重,芝棒割袋下地后,病害很快爆发。芝棒菌丝体成熟度不足灵芝菌丝体成熟度不足,菌丝体抗性弱,芝棒下地、菌袋剪口后仍易感染杂菌。阳光暴晒菌袋菌袋覆土后,日照强烈,迅速升温,芝棚遮阳度小(甚至没有遮阳),致使菌袋菌丝体被太阳暴晒受损后感染杂菌。芝棒下地后灌水由于是不完全脱袋栽培,芝棒下地后灌水,菌木表面及菌袋内的水份不能很快从袋内蒸发出来,过高的土壤水份会切断段木菌丝的氧气供给,致使芝棒呼吸不畅窒息死亡后感染杂菌。
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